HPLC નિષ્ફળતાઓ અને ઉકેલો માટે સૌથી વધુ સંભાવના

ઉચ્ચ-ચોકસાઇવાળા સાધન તરીકે, HPLC સરળતાથી કેટલીક મુશ્કેલીજનક નાની સમસ્યાઓ તરફ દોરી શકે છે જો તે ઉપયોગ દરમિયાન યોગ્ય રીતે સંચાલિત ન થાય.સૌથી સામાન્ય સમસ્યાઓમાંની એક કૉલમ કમ્પ્રેશન સમસ્યા છે.ખામીયુક્ત ક્રોમેટોગ્રાફનું ઝડપથી કેવી રીતે નિવારણ કરવું.HPLC સિસ્ટમમાં મુખ્યત્વે જળાશયની બોટલ, એક પંપ, એક ઇન્જેક્ટર, એક કૉલમ, કૉલમ તાપમાન ચેમ્બર, એક ડિટેક્ટર અને ડેટા પ્રોસેસિંગ સિસ્ટમનો સમાવેશ થાય છે.આખી સિસ્ટમ માટે, થાંભલા, પંપ અને ડિટેક્ટર એ મુખ્ય ઘટકો અને મુખ્ય સ્થાનો છે જે સમસ્યાઓ માટે સંવેદનશીલ છે.

સ્તંભના દબાણની ચાવી એ વિસ્તાર છે કે જેને HPLC નો ઉપયોગ કરતી વખતે નજીકથી ધ્યાન આપવાની જરૂર છે.સ્તંભના દબાણની સ્થિરતા ક્રોમેટોગ્રાફિક પીક આકાર, કૉલમની કાર્યક્ષમતા, વિભાજન કાર્યક્ષમતા અને રીટેન્શન સમય સાથે ગાઢ રીતે સંબંધિત છે.સ્તંભ દબાણ સ્થિરતાનો અર્થ એ નથી કે દબાણ મૂલ્ય સ્થિર મૂલ્ય પર સ્થિર છે, પરંતુ તેના બદલે દબાણની વધઘટ શ્રેણી 345kPa અથવા 50PSI ની વચ્ચે છે (જ્યારે સ્તંભનું દબાણ સ્થિર હોય અને ધીમે ધીમે બદલાતું હોય ત્યારે ગ્રેડિયન્ટ ઇલ્યુશનનો ઉપયોગ કરવાની મંજૂરી આપે છે).ખૂબ ઊંચું અથવા ખૂબ ઓછું દબાણ એ કૉલમ દબાણની સમસ્યા છે.

HPLC નિષ્ફળતાઓ અને ઉકેલો માટે સૌથી વધુ સંભાવના

1, HPLC ના ઉપયોગમાં ઉચ્ચ દબાણ એ સૌથી સામાન્ય સમસ્યા છે.આનો અર્થ એ છે કે દબાણમાં અચાનક વધારો.સામાન્ય રીતે, નીચેના કારણો છે: (1) સામાન્ય રીતે, આ પ્રવાહ ચેનલ અવરોધને કારણે છે.આ બિંદુએ, આપણે તેને ભાગરૂપે તપાસવું જોઈએ.aપ્રથમ, વેક્યુમ પંપના ઇનલેટને કાપી નાખો.આ બિંદુએ, PEEK ટ્યુબ પ્રવાહીથી ભરેલી હતી જેથી PEEK ટ્યુબ દ્રાવકની બોટલ કરતાં નાની હતી તે જોવા માટે કે પ્રવાહી ઇચ્છા મુજબ ટપકતું હતું કે નહીં.જો પ્રવાહી ટપકતું નથી અથવા ધીમે ધીમે ટપકતું નથી, તો દ્રાવક ફિલ્ટર હેડ અવરોધિત છે.સારવાર: 30% નાઈટ્રિક એસિડમાં અડધા કલાક માટે પલાળી રાખો અને અલ્ટ્રાપ્યુર પાણીથી કોગળા કરો.જો પ્રવાહી અવ્યવસ્થિત રીતે ટપકતું હોય, તો સોલવન્ટ ફિલ્ટર હેડ સામાન્ય છે અને તેની તપાસ કરવામાં આવી રહી છે;bપર્જ વાલ્વ ખોલો જેથી મોબાઇલ તબક્કો કૉલમમાંથી પસાર ન થાય, અને જો દબાણ નોંધપાત્ર રીતે ઓછું ન થાય, તો ફિલ્ટર વ્હાઇટ હેડ અવરોધિત છે.સારવાર: ફિલ્ટર કરેલ વ્હાઇટહેડ્સ દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને અડધા કલાક માટે 10% આઇસોપ્રોપેનોલ સાથે સોનિકેટ કરવામાં આવ્યા હતા.એમ ધારીને કે દબાણ 100PSI ની નીચે આવે છે, ફિલ્ટર કરેલ વ્હાઇટ હેડ સામાન્ય છે અને તેની તપાસ કરવામાં આવી રહી છે;cકૉલમના એક્ઝિટ એન્ડને દૂર કરો, જો દબાણ ઘટતું નથી, તો કૉલમ અવરોધિત છે.સારવાર: જો તે બફર સોલ્ટ બ્લોકેજ છે, તો દબાણ સામાન્ય થાય ત્યાં સુધી 95% કોગળા કરો.જો અવરોધ કેટલીક વધુ ઉચ્ચ સાચવેલ સામગ્રીને કારણે થાય છે, તો સામાન્ય દબાણ તરફ દોડવા માટે વર્તમાન મોબાઇલ તબક્કા કરતાં વધુ મજબૂત પ્રવાહનો ઉપયોગ કરવો જોઈએ.જો ઉપરોક્ત પદ્ધતિ અનુસાર લાંબા ગાળાના સફાઈ દબાણમાં ઘટાડો થતો નથી, તો કૉલમના ઇનલેટ અને આઉટલેટને તેનાથી વિપરીત સાધન સાથે જોડાયેલ માનવામાં આવે છે, અને કૉલમને મોબાઇલ તબક્કા સાથે સાફ કરી શકાય છે.આ સમયે, જો કૉલમનું દબાણ હજી પણ ઓછું ન થયું હોય, તો કૉલમ પ્રવેશદ્વારની ચાળણીની પ્લેટ ફક્ત બદલી શકાય છે, પરંતુ એકવાર ઑપરેશન સારું ન હોય, તો કૉલમની અસરમાં ઘટાડો તરફ દોરી જવાનું સરળ છે, તેથી ઓછો ઉપયોગ કરવાનો પ્રયાસ કરો.મુશ્કેલ સમસ્યાઓ માટે, કૉલમ રિપ્લેસમેન્ટ ધ્યાનમાં લઈ શકાય છે.

(2) ખોટો પ્રવાહ દર સેટિંગ: સાચો પ્રવાહ દર ફરીથી સેટ કરી શકાય છે.

(3) ખોટો પ્રવાહ ગુણોત્તર: પ્રવાહના વિવિધ પ્રમાણનો સ્નિગ્ધતા સૂચકાંક અલગ છે, અને ઉચ્ચ સ્નિગ્ધતા સાથે પ્રવાહનું અનુરૂપ સિસ્ટમ દબાણ પણ મોટું છે.જો શક્ય હોય તો, નીચલા સ્નિગ્ધતા દ્રાવકોને બદલી શકાય છે અથવા ફરીથી સેટ કરી શકાય છે અને તૈયાર કરી શકાય છે.

(4) સિસ્ટમ પ્રેશર શૂન્ય ડ્રિફ્ટ: લિક્વિડ લેવલ સેન્સરના શૂન્યને સમાયોજિત કરો.

2, દબાણ ખૂબ ઓછું છે (1) સામાન્ય રીતે સિસ્ટમ લિકેજને કારણે થાય છે.શું કરવું: દરેક કનેક્શન શોધો, ખાસ કરીને કૉલમના બંને છેડે ઇન્ટરફેસ, અને લીક વિસ્તારને સજ્જડ કરો.પોસ્ટને દૂર કરો અને PTFE ફિલ્મને યોગ્ય બળ સાથે સજ્જડ અથવા લાઇન કરો.

(2) ગેસ પંપમાં પ્રવેશે છે, પરંતુ આ સમયે દબાણ સામાન્ય રીતે અસ્થિર હોય છે, ઉચ્ચ અને નીચું.વધુ ગંભીરતાપૂર્વક, પંપ પ્રવાહીને શોષી શકશે નહીં.સારવાર પદ્ધતિ: સફાઈ વાલ્વ ખોલો અને 3~5ml/min ના પ્રવાહ દરે સાફ કરો.જો નહિં, તો સમર્પિત સોય ટ્યુબનો ઉપયોગ કરીને એક્ઝોસ્ટ વાલ્વ પર હવાના પરપોટા એસ્પિરેટ કરવામાં આવ્યા હતા.

(3) કોઈ મોબાઈલ ફેઝ આઉટફ્લો નહીં: જળાશયની બોટલમાં મોબાઈલ ફેઝ છે કે કેમ, મોબાઈલ ફેઝમાં સિંક ડૂબેલો છે કે કેમ અને પંપ ચાલી રહ્યો છે કે કેમ તે તપાસો.

(4) સંદર્ભ વાલ્વ બંધ નથી: સંદર્ભ વાલ્વ મંદી પછી બંધ થાય છે.તે સામાન્ય રીતે 0.1 સુધી નીચે જાય છે.સંદર્ભ વાલ્વ બંધ કર્યા પછી ~ 0.2mL/ મિનિટ.

સારાંશ:

આ પેપરમાં, લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં માત્ર સામાન્ય સમસ્યાઓનું જ વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું છે.અલબત્ત, અમારી વ્યવહારિક એપ્લિકેશનમાં, અમે વધુ અન્ય સમસ્યાઓનો સામનો કરીશું.ફોલ્ટ હેન્ડલિંગમાં, આપણે નીચેના સિદ્ધાંતોનું પાલન કરવું જોઈએ: અનુમાનિત પરિબળ અને સમસ્યા વચ્ચેનો સંબંધ નક્કી કરવા માટે એક સમયે માત્ર એક પરિબળ બદલો;સામાન્ય રીતે, જ્યારે મુશ્કેલીનિવારણ માટે ભાગો બદલી રહ્યા હોય, ત્યારે આપણે કચરો અટકાવવા માટે વિખેરી નાખેલા અખંડ ભાગોને ફરીથી સ્થાને મૂકવા પર ધ્યાન આપવું જોઈએ;સારી રેકોર્ડ આદત બનાવવી એ ફોલ્ટ હેન્ડલિંગની સફળતાની ચાવી છે.નિષ્કર્ષમાં, એચપીએલસીનો ઉપયોગ કરતી વખતે, નમૂનાની પ્રીટ્રીટમેન્ટ અને સાધનોના યોગ્ય સંચાલન અને જાળવણી પર ધ્યાન આપવું મહત્વપૂર્ણ છે.