રિકોમ્બિનન્ટ પ્રોટીન એન્ટિજેન્સમાં ઘણી વાર વિવિધ એપિટોપ્સ હોય છે, જેમાંથી કેટલાક સિક્વન્સ એપિટોપ્સ હોય છે અને કેટલાક માળખાકીય એપિટોપ્સ હોય છે.વિકૃત એન્ટિજેન્સ સાથે પ્રાણીઓની રોગપ્રતિરક્ષા દ્વારા મેળવેલા પોલીક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ એ વ્યક્તિગત એપિટોપ્સ માટે વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝનું મિશ્રણ છે અને સામાન્ય રીતે કુદરતી રચનાઓ અથવા વિકૃત લક્ષ્ય પ્રોટીનને શોધવા માટે ઉપયોગમાં લઈ શકાય છે.ઇમ્યુનોજેન્સ તરીકે વિકૃત પ્રોટીનનો ઉપયોગ કરવાનો આડ ફાયદો એ છે કે વિકૃત પ્રોટીન વધુ રોગપ્રતિકારક હોય છે અને પ્રાણીઓમાં મજબૂત રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવને ઉત્તેજિત કરી શકે છે.
Escherichia coli ની અભિવ્યક્તિ પદ્ધતિ સામાન્ય રીતે એન્ટિજેનિક હેતુઓ માટે પસંદ કરવામાં આવે છે કારણ કે તે સમય અને નાણાંની દ્રષ્ટિએ સૌથી ખર્ચાળ સિસ્ટમ છે.લક્ષ્ય પ્રોટીન અભિવ્યક્તિની સંભાવના અને શુદ્ધિકરણની સુવિધાને સુધારવા માટે, કેટલીકવાર લક્ષ્ય પ્રોટીનનો માત્ર એક નાનો ટુકડો, જેમ કે ચોક્કસ ડોમેન, વ્યક્ત કરવામાં આવે છે.
પ્રોટીનનું ત્રિ-પરિમાણીય માળખું
પ્રોટીનનું ચોક્કસ ડોમેન
જો એન્ટિબોડીની તૈયારીનો હેતુ માત્ર wb શોધવાનો હોય, તો એન્ટિજેન તરીકે કૃત્રિમ નાના પેપ્ટાઈડનો ઉપયોગ કરવો તે આર્થિક અને ઝડપી છે, પરંતુ પેપ્ટાઈડ સેગમેન્ટની અયોગ્ય પસંદગીને કારણે નબળી રોગપ્રતિકારક શક્તિ અથવા બિન-પ્રાપ્તિનું જોખમ રહેલું છે.એન્ટિબોડીની તૈયારીમાં લાંબો સમય જરૂરી હોવાથી, પ્રયોગની સફળતા દર સુનિશ્ચિત કરવા માટે પોલીપેપ્ટાઈડ એન્ટિજેનનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિબોડીઝ તૈયાર કરવા માટે બે કે ત્રણ અલગ અલગ પેપ્ટાઈડ સેગમેન્ટ્સ પસંદ કરવામાં આવે છે.
ઇમ્યુનાઇઝેશન માટે પોલિપેપ્ટાઇડ એન્ટિજેનની શુદ્ધતા 80% થી વધુ હોવી જરૂરી છે.જો કે ઉચ્ચ શુદ્ધતા સૈદ્ધાંતિક રીતે વધુ સારી વિશિષ્ટતા સાથે એન્ટિબોડીઝ મેળવી શકે છે, વ્યવહારમાં, પ્રાણીઓ હંમેશા મોટી સંખ્યામાં બિન-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝ ઉત્પન્ન કરે છે, આમ એન્ટિજેન શુદ્ધતાના લાભોને ઢાંકી દે છે.
વધુમાં, નાના પેપ્ટાઈડ્સમાંથી એન્ટિબોડીઝની તૈયારી તેની ઇમ્યુનોજેનિસિટી વધારવા માટે યોગ્ય વાહક એન્ટિજેન સાથે ક્રોસ-લિંક હોવી જોઈએ.બે સામાન્ય એન્ટિજેનિક કેરિયર્સ KLH અને BSA છે.
પોસ્ટ સમય: માર્ચ-23-2023