લાંબા પેપ્ટાઇડ સંશ્લેષણની સમસ્યાઓ અને ઉકેલો

જૈવિક સંશોધનમાં, લાંબા ક્રમ સાથે પોલિપેપ્ટાઇડ્સનો સામાન્ય રીતે ઉપયોગ થાય છે.ક્રમમાં 60 થી વધુ એમિનો એસિડ ધરાવતા પેપ્ટાઇડ્સ માટે, સામાન્ય રીતે જનીન અભિવ્યક્તિ અને SDS-PAGE નો ઉપયોગ તેમને મેળવવા માટે થાય છે.જો કે, આ પદ્ધતિ લાંબો સમય લે છે અને અંતિમ ઉત્પાદન અલગ કરવાની અસર સારી નથી.

લાંબા પેપ્ટાઇડ સંશ્લેષણ માટે પડકારો અને ઉકેલો

લાંબા પેપ્ટાઇડ્સના સંશ્લેષણમાં, અમને હંમેશા સમસ્યાનો સામનો કરવો પડે છે, એટલે કે, સંશ્લેષણમાં ક્રમના વધારા સાથે ઘનીકરણ પ્રતિક્રિયાના સ્ટેરિક અવરોધ વધે છે, અને પ્રતિક્રિયા પૂર્ણ કરવા માટે પ્રતિક્રિયા સમયને સમાયોજિત કરવાની જરૂર છે.જો કે, પ્રતિક્રિયાનો સમય જેટલો લાંબો હોય છે, તેટલી વધુ આડઅસરો ઉત્પન્ન થાય છે, અને લક્ષ્ય પેપ્ટાઇડનો એક ભાગ રચાય છે.આવા અવશેષો - ઉણપવાળી પેપ્ટાઈડ સાંકળો એ લાંબા પેપ્ટાઈડ સંશ્લેષણમાં ઉત્પન્ન થતી મુખ્ય અશુદ્ધિઓ છે.તેથી, લાંબા પેપ્ટાઈડના સંશ્લેષણમાં, આપણે જે મુખ્ય સમસ્યાને દૂર કરવી જોઈએ તે છે ઉચ્ચ ગુણવત્તાની પ્રતિક્રિયાની સ્થિતિ અને પ્રતિક્રિયા પદ્ધતિઓનું અન્વેષણ કરવું, જેથી એમિનો એસિડ ઘનીકરણ પ્રતિક્રિયાને વધુ વ્યાપક અને સંપૂર્ણ બનાવી શકાય.વધુમાં, પ્રતિક્રિયા સમય ઘટાડવો, કારણ કે પ્રતિક્રિયાનો સમય જેટલો લાંબો છે, તેટલી વધુ અનિયંત્રિત બાજુ પ્રતિક્રિયાઓ, વધુ જટિલ આડપેદાશો.તેથી, નીચેના ત્રણ મુદ્દાઓનો સારાંશ આપવામાં આવ્યો છે:

માઇક્રોવેવ સંશ્લેષણનો ઉપયોગ કરી શકાય છે: સંશ્લેષણ પ્રક્રિયામાં કેટલાક એમિનો એસિડ્સ કે જે સંકલિત કરવા માટે સરળ નથી, માટે માઇક્રોવેવ સંશ્લેષણનો ઉપયોગ કરી શકાય છે.આ પદ્ધતિ નોંધપાત્ર પરિણામો આપે છે, અને પ્રતિક્રિયા સમયને મોટા પ્રમાણમાં ઘટાડે છે, અને બે મુખ્ય ઉપ-ઉત્પાદનોની રચના ઘટાડે છે.

ફ્રેગમેન્ટ સિન્થેસિસ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરી શકાય છે: જ્યારે કેટલાક પેપ્ટાઈડ્સ સામાન્ય સંશ્લેષણ પદ્ધતિઓ દ્વારા સંશ્લેષણ કરવા મુશ્કેલ હોય છે અને શુદ્ધ કરવું સરળ નથી, ત્યારે અમે પેપ્ટાઈડના ચોક્કસ સેગમેન્ટમાં પેપ્ટાઈડ સાંકળમાં કેટલાક એમિનો એસિડનું સંપૂર્ણ ઘનીકરણ અપનાવી શકીએ છીએ.આ પદ્ધતિ સંશ્લેષણમાં ઘણી સમસ્યાઓનો ઉકેલ પણ લાવી શકે છે.

Acylhydrazide સંશ્લેષણનો ઉપયોગ કરી શકાય છે: પેપ્ટાઇડ્સનું એસિલહાઇડરાઇડ સંશ્લેષણ એ એન-ટર્મિનલ સાયસ પેપ્ટાઇડ અને સી-ટર્મિનલ પોલીપેપ્ટાઇડ હાઇડ્રેઝાઇડ રાસાયણિક પસંદગીયુક્ત પ્રતિક્રિયાના ઘન-તબક્કાના સંશ્લેષણની પદ્ધતિ છે જે પેપ્ટાઇડ બોન્ડિંગ પદ્ધતિને હાંસલ કરવા માટે એમાઇડ બોન્ડની રચના વચ્ચે છે.પેપ્ટાઇડ સાંકળમાં Cys ની સ્થિતિના આધારે, આ પદ્ધતિ સમગ્ર પેપ્ટાઇડ સાંકળને બહુવિધ ક્રમમાં વિભાજિત કરે છે અને અનુક્રમે તેનું સંશ્લેષણ કરે છે.અંતે, લક્ષ્ય પેપ્ટાઇડ પ્રવાહી-તબક્કાના ઘનીકરણ પ્રતિક્રિયા દ્વારા મેળવવામાં આવે છે.આ પદ્ધતિ માત્ર લાંબા પેપ્ટાઇડના સંશ્લેષણના સમયને મોટા પ્રમાણમાં ઘટાડે છે, પરંતુ અંતિમ ઉત્પાદનની શુદ્ધતામાં પણ નોંધપાત્ર વધારો કરે છે.

લાંબા પેપ્ટાઇડ શુદ્ધિકરણ

લાંબા પેપ્ટાઈડ્સની વિશિષ્ટતા અનિવાર્યપણે ક્રૂડ પેપ્ટાઈડ્સના જટિલ ઘટકો તરફ દોરી જાય છે.તેથી, HPLC દ્વારા લાંબા પેપ્ટાઈડ્સને શુદ્ધ કરવું પણ એક પડકાર છે.પોલિપેપ્ટાઇડ શુદ્ધિકરણ પ્રક્રિયાની એમાયલોઇડ શ્રેણી, ઘણો અનુભવ શોષી લે છે અને લાંબા પેપ્ટાઇડના શુદ્ધિકરણમાં સફળતાપૂર્વક ઉપયોગમાં લેવાય છે.નવા સાધનો અપનાવવાથી, બહુવિધ શુદ્ધિકરણ પ્રણાલીઓનું મિશ્રણ, પુનરાવર્તિત વિભાજન અને અન્ય અનુભવ પદ્ધતિઓ, લાંબા પેપ્ટાઇડ શુદ્ધિકરણની સફળતા દરમાં ઘણો સુધારો થયો હતો.